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        正辛酸在蛋白質消化中應用的研究

        發布時間:2021-08-11

        蛋白質是生命的物質基礎 ,食品中蛋白質含 量的高低是評價食品營養成分的重要指標之一。

        蛋白質的測定有多種方法 ,但絕大部分方法均需將食品經過硫酸消化處理 ,將有機氮轉變為無機氮 ,然后 進行測定。因此 ,樣品的消化處理是測定蛋白質的重 要步驟 ,但在消化過程中樣品會炭化變黑 ,產生大量 泡沫 ,使黑色物質上升過高而濺出 ,造成損失 ,影響測定結果的準確性。

        通常采取的是減小火力并加入 消泡劑 ,傳統加入的液體石蠟消泡效果較差 ,導致消 化時間長 ,消泡效果并不理想。而實踐中常采用正辛 酸做消泡劑,不但可以減小泡沫產生 ,而且省時省 力 ,效果理想。本研究就正辛酸對測定結果的影響進行試驗研究 ,以期為正辛酸的正確使用提供參考。

        1 材料、試劑與方法

        1. 1 儀器與試劑 石英消化管 ,凱氏定氮儀 ,混合消化液  ( H2 O2 ∶ H2 SO4∶ H2O= 1∶ 2∶ 3) ,混合催化劑 ( Cu SO4∶ K2 SO4= 1∶ 10,研細 ,備用 ) ,正辛酸 (化學純 ,中國 醫藥 (集團 )上?;瘜W試劑公司生產 ) ,其他試劑均為 分析純 (廣州化學試劑公司生產 )。

        1. 2 材料的制備

        1. 2. 1 試樣的制備 樣品來源于深圳各口岸送檢 樣品 ,烘干 ,粉碎 ,縮分后備用。

        1. 2. 2 試液的制備 對照組。 精確稱取均勻樣品 0. 2~ 2. 0 g (約相當于氮 30~ 40 mg ) ,小心移入干 燥的消化管底部 ,加入混合催化劑 1. 5 g ,同時小心 加入混合消化液 20 m L,搖勻 ,斜置于電爐上進行消 化。 控制火力使溶液保持穩定的沸騰狀態。 當溶液 呈藍綠色透明澄清后 ,再加熱 30 min,冷卻后將消 化液轉入 100 mL容量瓶中 ,搖勻 ,加水定容 ,備用。

        正辛酸組。 消化液在加熱前滴加 3~ 4滴正辛 酸 ,在加熱過程中消化液變黑 ,有大量泡沫產生時再 滴加 1~ 2滴正辛酸 ,泡沫迅速消退。如此反復 ,直至 泡沫停止。 溶液保持穩定的沸騰狀態。 當溶液呈藍 綠色透明澄清后 ,再加熱 30 min,冷卻后將消化液 轉入 100 mL容量瓶中 ,搖勻 ,加水定容 ,備用。 空白組試液。 同時做一空白試液 ,除不加樣品 外 ,從加入催化劑開始操作與正辛酸組相同。

        1. 3 試驗方法

        1. 3. 1 對照試驗 正辛酸組和對照組以及空白組 的消化液分別用凱氏定氮裝置蒸餾和吸收 ,最后用 H2 SO4 標準溶液滴定吸收液扣除空白值 ,計算出含 氮量。

        公式如下: N ( mg g- 1 ) = (cH2SO4 × VH2 SO 4 ) × 10- 3× MN 2G 式中 , N 表示樣品中的氮含量。 cH2SO4表示加入 H2 SO4 的摩爾濃度 ( mo l· L- 1 ) ; V H2SO4表示加入 H2 SO4 的體積數 ( mL); MN 表示 N 原子的摩爾質量 ( g· mo l- 1 ) ; G表示樣品質量 (g )。

        1. 3. 2 回收率試驗 將已知含氮量的不同樣品各 精確稱取 0. 2~ 2. 0 g ,并在每份樣品中加入一定量 的 ( N H4 ) 2 SO4 ,樣品處理同前。消化液用凱氏定氮裝 置蒸餾和吸收 ,最后用 H2 SO4 標準溶液滴定吸收消 化液 ,計算出含氮量。 公式同前。

        1. 3. 3 樣品含氮量的精密度 精確稱取不同的均 勻樣品 0. 2~ 2. 0 g (約相當于氮 30~ 40 mg ) ,進行 消化 ,方法同前。將冷卻后的消化液轉入 100 mL容量瓶中 ,搖勻 ,加水定容 ,備用。消化液用凱氏定氮裝 置蒸餾和吸收 ,最后用 H2 SO4 標準溶液滴定吸收消 化液 ,計算出含氮量。

        2 結果與討論

        2. 1 對照試驗 在不同樣品中加入一定量的正辛酸對結果的影 響 (結果為 5次平均值 )列于表 1。從表 1結果看 ,相 對誤差在 - 0. 92~ + 0. 66之間 ,說明不同含氮量的 樣品在消化時加入正辛酸后并不影響測定結果。

        2. 2 回收率試驗 在樣品中加入一定量的 ( N H4 ) 2 SO4 ,回收率試 驗結果 (表 2)表明 ,回收率為 99. 8% ~ 100. 7% ,說 明不同含氮量的樣品在消化時加入正辛酸不影響測 定結果。

        2. 3 精密度試驗 對不同樣品進行精密度重復測定 ,結果 (表 3) 表明 ,精密度為 0. 222~ 0. 508,說明同一樣品在消 化時加入正辛酸并不影響測定結果。

        3 小 結 試驗證明采用正辛酸做消泡劑 ,能夠縮短蛋白 質消化時間 ,減少損失 ,方法簡便 ,安全 ,快捷 ,又不 影響測定結果 ,效果比液體石蠟要好。 尤其對脂肪 , 糖分含量較高的樣品 ,效果更為顯著



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